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　　非洲豬瘟快檢設備如何校準?新手也能學會的操作步驟

　　“檢測結果忽陰忽陽，到底是豬有問題還是設備不準?" 這是新手養殖戶使用快檢設備時的常見困惑。校準是保障檢測精度的核心環節，無論是膠體金檢測儀還是 PCR 儀，都需按規范操作才能避免誤判。以下結合行業實操案例與技術標準，分設備類型拆解校準步驟，新手跟著做就能上手。

　　一、校準前：準備工作與核心原則

　　校準前需明確兩個關鍵原則：一是定期校準，膠體金設備建議每 3 個月校準 1 次，PCR 儀每 6 個月校準 1 次，設備維修后必須重新校準;二是標準合規，需使用批準的標準品(如 ASFV 陽性標準核酸)和配套試劑，不可用普通樣本替代。

　　準備工具需備齊四類物品：對應設備的陽性 / 陰性標準品、校準記錄表格、未開封新批次配套試劑、設備說明書。校準環境要滿足室溫 15-30℃、濕度 40%-60%，避免陽光直射和電磁干擾，這是保證校準準確性的基礎。

　　二、膠體金快檢設備：3 步完成基礎校準

　　膠體金檢測儀(含檢測卡讀數儀)結構簡單，校準重點在信號識別與判讀準確性，新手 10 分鐘即可完成。

　　步驟 1：設備自檢與歸零

　　接通電源后開機，等待設備自檢完成(通常顯示 “Ready")。按說明書操作進入 “校準模式"，選擇 “零點校準"，設備自動清除原有數據，完成后顯示 “歸零成功"。若歸零失敗，重啟設備重試，這一步能排除殘留信號干擾。

　　步驟 2：標準品檢測與參數比對

　　取出陽性標準品，按常規流程滴加至配套檢測卡，插入讀數儀檢測。記錄 T 線 / C 線比值(如 0.85)，與標準品說明書參考范圍(如 0.7-0.9)對比。再用陰性標準品檢測，確認讀數應<0.1(具體以設備標準為準)。

　　步驟 3：結果驗證與記錄

　　兩次檢測數值均在范圍內則校準通過;若超出范圍，更換新批次試劑重試。校準后填寫記錄，注明設備型號、日期、標準品批號及數值，作為追溯依據。

　　三、PCR 快檢設備：5 步精準校準(以熒光定量 PCR 儀為例)

　　PCR 儀校準核心是溫控精度與熒光靈敏度，需嚴格操作，全程約 30 分鐘。某省疫控中心曾因溫控失準導致檢測停擺，印證了校準的重要性。

　　步驟 1：設備預熱與程序調取

　　開機預熱 30 分鐘，確保加熱模塊穩定。進入菜單選擇 “校準程序"，校準可導入廠家提供的 ASFV B646L 基因校準模板。

　　步驟 2：溫控模塊校準

　　將標準溫度探針插入反應孔，設置 95℃(變性)、55℃(退火)、72℃(延伸)三個關鍵點。啟動程序后，實際溫度誤差需≤±0.5℃。若顯示 “溫度傳感器異常" 等報錯，可能是硬件故障，需聯系廠家維修。

　　步驟 3：熒光通道校準

　　取 FAM 通道標準熒光微球，按 1:10 稀釋后加入反應管檢測。熒光強度值與參考值偏差需<10%，多通道設備需逐個校準。

　　步驟 4：擴增效率驗證

　　用已知濃度的 ASFV 陽性標準核酸(如 1000 拷貝 /μL)配制反應體系，運行校準程序。擴增效率應在 90%-110% 之間，否則調整程序參數。

　　步驟 5：報告生成與確認

　　校準通過后打印自動生成的報告存檔。未通過需先檢查試劑是否過期、標準品是否失效，排除后重試。

　　四、新手避坑指南：4 個關鍵注意事項

　　標準品不可替代：必須用合規標準品，實際樣本無法保證溯源性，這是檢測認可的基本要求。

　　周期靈活調整：閑置超期需重新校準，潮濕地區可將膠體金設備校準間隔縮至 2 個月。

　　故障科學處理：多次校準失敗時，若設備彈出傳感器報錯，不要自行拆機，應聯系廠家或具備計量認證資質的第三方機構。

　　維護聯動校準：定期清潔設備光學部件、檢查密封性，可減少校準頻次，延長設備壽命。

　　河南某豬場曾因未及時校準漏檢 5 頭病豬，損失超 10 萬元。新手只要按步驟操作，同時做好日常維護，就能讓快檢設備始終保持 “火眼金睛"，筑牢防疫道防線。